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- 简答题简述PCR及其临床应用。
- 聚合酶链反应(PCR)：利用DNA聚合酶（如Tag DNA聚合酶）等在体外条件下，催化一对引物间的特异DNA片段合成的基因体外扩增技术。 引物：单链DNA片段。 过程：变性DNA双链-单链(93～98℃)，退火引物与模板结合(37～65℃)，延伸双链合成(70～75℃)。 常见PCR技术的类型：原位PCR、逆转录PCR(RT-PCR)及定量RT-PCR、反向PCR、PCR-SSCP、PCR-ELISA.固相锚定PCR、mRNA差异显示逆转录PCR。 PCR的应用：(1)在感染性疾病中的应用：对传染性疾病进行病原学确证诊断；对病原体进行基因分型和同源性比较；克隆病原体各种蛋白质的基因，用于蛋白表达，制备诊断试剂或疫苗；发现新病原体；克隆病原体各种基因，建立基因表达载体，用于基因治疗。 (2)遗传性疾病的基因诊断：发现的遗传病有4000多种；产前诊断PCR-RFLP；PCR-ASO。 (3)肿瘤的研究及诊断：癌基因与抑癌基因。 (4)在法医学中的应用：个人认识；亲子鉴定。 (5)其他应用：DNA克隆；引入点突变、缺失或插入；重组PCR；DNA测序；示差PCR。
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