试题详情
[材料题] 荧光定量PCR的引物和探针对反应体系有重要影响。
多项选择题1.荧光定量PCR的引物应具有以下哪些特点

A、引物的最适长度为20～40bp

B、G+C含量为20%～80%，45%～55%为最佳

C、采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR，PCR引物不能形成明显的引物二聚体

D、TaqMan探针荧光定量PCR引物的Tm值应在58～60℃

E、同一对引物的Tm值相差不超过4～5℃

F、引物3端最后5个核苷酸应只有1～2个G/C

  • 关注下方微信公众号，搜题查看答案

多项选择题2.TaqMan探针应具有以下哪些特点

A、探针的Tm值应比引物的Tm值高5～10℃，通常其Tm为65～72℃

B、探针应尽可能长

C、探针的5端不要有C

D、探针的3端要进行封闭

E、探针中的G不能多于C

F、如果探针用于检测等位基因差异或突变位点，应将错配核苷酸放在探针中间

  • 关注下方微信公众号，搜题查看答案

多项选择题3.荧光定量PCR的优点包括

A、实时监测，定量范围大

B、繁琐费时

C、灵敏度高

D、准确度高

E、大大降低了实验室污染的可能

F、重复性好

  • 关注下方微信公众号，搜题查看答案

热门试题