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简答题试述非标记抗体酶免疫组织化学染色。
  • 非标记抗体酶免疫组织化学技术中，酶不是标记在抗体上，而是首先利用酶免疫动物，制备效价高、特异性强的抗酶抗体，利用免疫学反应将抗酶抗体与组织抗原联系在一起。该方法避免了酶标记时对抗体的损伤，同时也使方法的敏感性提高了。它有下列几种技术类型： (1)酶桥法 抗酶抗体作为第三抗体，利用桥抗体（第二抗体），将特异性识别组织抗原的第一抗体与第三抗体连接起来，形成酶联的抗原-抗体复合物，并加底物显色。 (2)过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)法 PAP法是在酶桥法基础上加以改良。PAP法首先把酶桥法的第三抗体（抗酶抗体）与酶组成可溶性复合物（PAP复合物）。该复合物由2个抗酶抗体与3个过氧化物酶分子组成，呈五角形结构，十分稳定。 (3)双桥PAP法 该法建立在PAP法的基础上。其基本原理是在PAP法中利用两次连接桥抗体和PAP复合物而建立起来的，通过双桥可结合更多的PAP复合物于抗原分子上，以增强敏感性。这种放大方式重复使用桥抗体，使桥抗体同PAP复合物中抗酶抗体的未饱和的Fc段结合，或桥抗体同特异性第一抗体尚未饱和的Fc段结合。 (4)碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)法 辣根过氧化物酶(HRP)是免疫组织化学的首选用酶，但是有些组织细胞含内源性过氧化物酶限制了HRP的广泛应用，尽管用甲醇、过氧化氢进行处理可以抑制内源性过氧化物酶活性，但是同时也会影响抗原的显示。

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