血清总T测定

简答题血清总T测定

正确答案：[方法] 放射免疫分析法(RIA)。 [操作] 以中国原子能研究院的药盒说明书为例： 1．试剂内容及配制 (1)[~125.gif]I-T：红色，148～185kBq(4～5μci)／22mL，含有巴比妥钠缓冲剂、ANS、BSA，直接用于实验。 (2)抗T血清：含有巴比妥钠缓冲剂、BSA、NaN，使用时加入22mL蒸馏水，溶解后为蓝色液体，放置10分钟后用于实验。 (3)T标准品：配制在去T正常人血清中，使用时分别加入500μL蒸馏水，放置10分钟并轻轻旋转瓶子使其充分溶解，方可用于实验。 (4)PEG：含巴比妥钠缓冲剂，溶液直接用于实验。 2．分析步骤 (1)严格按照操作顺序表加试剂。 (2)各管加入PEG后充分混匀，在离心机上以3500r／min的转速离心15分钟。 (3)立即弃去上清液。 (4)测T管及各管沉淀部分的放射性计数率。 [结果计算] 1．以沉淀管计数率减去仪器本底计数率得B以B为纵坐标，以T标准浓度为横坐标，在直角坐标纸上作标准曲线。待测样品的沉淀计数率减去本底的计数率后，在标准曲线上查出样品的T含量。 2．以B／B×100为纵坐标，以T标准为横坐标，在三级半对数坐标纸上作标准曲线。待测样品的B／B×100在标准曲线上查出样品的T含量。 B／B×100=标准(样品管计数率-本底计数率)/(零标准管计数率-本底计数率) 以上两种计算方法任用哪种都可以。目前多以计算机自动计算结果并得出质控指标。 [提问] 简述影响放射免疫分析测定结果的常见原因。 (1)各种仪器设备的准确性、稳定性和效率不好。 (2)药盒的纯度、质量、稳定性不佳。 (3)基本操作如取样、提取、沉淀、分离、保温条件不适当，工作人员不遵守操作规程，加样器使用不恰当等。 (4)样品收集不好，储存温度不适等。 (5)测量及标准曲线制作不好。
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