试题详情
- 简答题试论述如何提高杂交技术的杂交信号检测效率?
- 需综合考虑以下因素:①选择探针:根据不同杂交实验要求,选择不同的核酸探针。检测单个碱基改变选用寡核苷酸探针;检测单链选用与其互补的DNA单链探针、RNA探针或寡核苷酸探针;检测复杂的靶核苷酸序列和病原体选用特异性强的长的双链DNA探针;原位杂交选用寡核苷酸探针和短的PCR标记探针。②探针的标记方法:考虑实验的要求,如灵敏度和显示方法,检测单拷贝基因序列时,选用标记效率高,显示灵敏的探针标记方法。对灵敏度要求不高时,选用保存时间长的探针标记方法。③探针的浓度:一般来说,探针浓度增加,杂交率也增加,但过高会增
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