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- 简答题简述实时荧光定量PCR中分子信标技术的原理
- 分子信标实际上是一段荧光素标记的寡核苷酸,由于序列的特殊性使其结构由环状区 (15?30个核苷酸)和柄区(5?8bP)组成,5^末端标记荧光报告基团,y末端标记荧光淬灭 基团。当无目的序列存在时,分子信标的结构呈茎环结构,此时由于两端的基团相距非常 接近,即可发生FRET;荧光报告基团发出的荧光被淬灭基团吸收并以热的形式散发,此时 没有荧光信号,因而荧光本底极低。当有目的序列存在时,分子信标与靶序列特异性结合, 环状区单链与靶序列杂交而形成稳定的、比柄区更长的双链,分子信标的构型发生变化,从 而使荧光基团
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