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简答题简述B细胞功能的检测。
  • B细胞的主要功能是产生各类抗体。检测血清中各类抗体的水平实际是对B细胞的功能的判定。 (1)反向溶血空斑试验(RHPA) 是一种体外检测人类Ig分泌细胞的方法。该方法把待测细胞、抗Ig抗体、SPA-SRBC以及补体4种成分与琼脂糖凝胶混合,注入小室内,经过温育后,抗体生成细胞产生的Ig同抗Ig抗体结合形成复合物,复合物中的IgGFc片断又与连接在SRBC上的SPA结合,激活补体,致使SRBC溶解,在Ig分泌细胞周围形成溶血空斑。 (2)酶联免疫斑点试验(ELISPOT) 基本步骤为:用已知抗原包被固相载体,再加入待检测的抗体形成细胞(B细胞),就可以诱导相应抗体的分泌;分泌的抗体同已包被抗原结合,在抗体分泌细胞周围形成抗原抗体复合物,这样细胞就吸附于载体上;再加入酶标记的第二抗体与细胞上的抗体(一抗)结合,利用底物显色反应的深浅,就可检测出生成的抗体量,并可以在显微镜下计数着色的斑点形成细胞。该方法可同时定量检测不同抗原诱导的抗体分泌,并且稳定性好,特异性高。
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