A、所用的碳酸浓度过高，不易被脱色

B、结核分枝杆菌含脂质较多，盐酸酒精不易使之脱色

C、脱色所用盐酸酒精PH过低，不易使结核分枝杆菌脱色

D、美蓝不能用于染细菌

E、结核分枝杆菌细胞壁含糖多，不易被酒精脱色