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简答题细胞融合的主要方法有哪些?特点是什么? (章节:7 难度:3 )
  • 1.病毒诱导法 常用的病毒:仙台病毒又称日本血凝病毒(HVJ),病毒促使细胞融合的主要步骤如下:两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近,使两个细胞膜、胞质间互相渗透 ,细胞核互相融合, 进入正常的细胞分裂途径,杂种子细胞。(2分) 2化学法(聚乙二醇) PEG带有大量的负电荷,和原生质体表面的负电荷在钙离子的连接下,形成静电键,促使异源的原生质体间的粘着和结合,在高pH,高钙离子的溶液的作用下,将钙离子和与质膜结合的PEG分子洗脱,导致电荷平衡失调并重新分配,进而形成具有共同质膜的融合体。(2分) 3 物理法一电融合诱导法: 与PEG法比较,电融合法优点较多,如融合率高、重复性强、对原生质体伤害小;装置精巧、方便简单、可在显微镜下观察或录像融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控制性强等等。(2分)
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