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简答题简述双向凝胶电泳(二维电泳)的工作原理 (章节:第05章 难度:3 )
  • 第一维采用等电聚集(IEF)电泳。当把蛋白质加人到含有pH梯度的载体时,如果蛋白质所在位置的pH值与其等电点不同,则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷,在外加强电场的作用下,蛋白分子就会分别向正极或负极泳动,直到pH值与其等电点相等的位置,蛋白质不再泳动,而浓缩成狭窄的区带。第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。SDS-PAGE就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后,其结果不再是条带状,而是呈现为斑点状。
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