试题详情
- 简答题如何提高PCR扩增的特异性？ ( 难度：4 ）
- ① 升高退火温度可增加引物与模板结合的特异性；② 缩短退火和延伸时间，可减少错误引发及多余的DNA聚合酶分子参与酶促延伸的机会；③降低引物和酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是能减少引物二聚体的引发；④ 改变MG2+的浓度可进一步提高扩增的特异性；⑤ 引物设计的特异性；⑥ 减少循环次数；⑦ 热启动（Hot StArt）。即首先将模板变性，然后在较高温度时加入TAq DNA聚合酶、引物及MGCl2等一些重要成分，这样使得引物在较高温度下与模板退火，提高了反应的严谨性，使扩增更特异；⑧ 采用二对引物即外引物和内引物进行扩增来提高扩增的特异性。
关注下方微信公众号，在线模考后查看
热门试题