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简答题什么是印迹杂交,简述Southern印迹技术基本操作步骤。 ( 难度:4 )
  • 印记杂交是指将凝胶电泳分离的核酸片段转移到特定的固相支持物上,在转移过程中核酸片段保持其原来的相对位置不变,然后采用标记的探针与结合在固相支持物上的核酸片段进行杂交的技术。SouthErn印迹技术的基本操作步骤:基因组DNA经限制性内切酶消化后进行电泳;(2分)将含有DNA片段的凝胶放入变性溶液使DNA变性;将固相支持物放在胶上,将胶上的DNA片段转移到固相支持物上,通过加热使DNA固定于膜上;(4)探针与膜上DNA杂交;(5)冲洗掉未杂交的探针,检测杂交信号。
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