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简答题什么是PCR,简述PCR反应原理。 ( 难度:4 )
  • PCR(聚合酶链反应):是利用DNA聚合酶等在体外条件下(,催化一对引物间的特异DNA片段合成的基因体外扩增技术。原理:类似于DNA天然复制过程,由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:(1)变性,即在较高温度下使双链模板DNA变性解链成单链DNA,以提供复制的模板;(2)退火,即在较低温度下使加入的引物与待扩增的DNA区域特异性地结合,以提供DNA复制起始的3’-OH;(3)延伸,即在适当温度下,DNA聚合酶特异性结合到DNA模板上的引物3’-OH端,以DNTP为反应原料,以靶序列为模板,根据碱基互补配对原则,进行DNA链的延伸,即合成新的DNA分子。这三个过程组成一个循环周期,每个周期合成的产物又可作为下一个周期的模板,如此循环往复,达到扩增目的。
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