A、选择一个适合的载体

B、限制性核酸内切酶在特异位点切割质粒和目的基因

C、用连接酶连接载体DNA和目的DNA，形成重组体

D、用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌  

E、重组体用融合法导入细胞