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多项选择题关于ABC法正确的是

A、制备酶标生物素

B、亲合素和HRP-B的浓度比不应高于4∶1

C、反应时，游离亲合素作为关键的桥联剂

D、先按比例将酶标生物素与亲合素混合成复合物，然后直接使用

E、需制备生物素化的抗体

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