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[材料题] 内标荧光定量PCR方法将已知浓度的标准品与样品在同一管中进行扩增,已在临床上广泛应用。
多项选择题1.根据所用内标品的不同,内标荧光定量PCR法分为

A、数字PCR

B、原位PCR

C、反转录PCR

D、竞争定量PCR

E、巢式PCR

F、非竞争内标定量PCR

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多项选择题2.内标法的优点包括

A、重复性不好

B、排除了PCR管间扩增效率不同所致的差异

C、可用于监测仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性

D、定量准确

E、可用于监测标本中抑制物或干扰物所致的假阴性

F、可用于监测试剂失效或Taq DNA聚合酶活性降低所致的假阴性

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多项选择题3.常用的构建竞争性内标的方法包括

A、基因敲除靶基因扩增产物的引物部位序列

B、用引物扩增含靶基因引物结合位点的非同源性DNA序列

C、用引物扩增不含靶基因引物结合位点的同源性DNA序列

D、定点突变靶基因扩增产物的引物部位序列

E、将靶序列克隆人质粒载体,对其进行插入或缺失修饰

F、靶基因扩增产物的突变,保留引物部位序列不变

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