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单项选择题以下关于流式细胞分析法检测细胞因子的步骤描述不正确的是

A、用流式细胞仪分析荧光阳性细胞百分比和荧光强度

B、用含5%脱脂奶粉和钙、锂离子的PBS溶液，重悬已固定的细胞，封闭非特异性结合位点

C、常使用4%多聚甲醛固定细胞

D、分离和培养待检细胞

E、用荧光素标记的细胞因子特异性单克隆抗体做荧光抗体染色

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