试题详情
[材料题] 建立一个新的PCR反应，需要优化其反应条件以获得最适反应条件。
多项选择题1.需要优化的PCR反应条件包括

A、模板量和纯度

B、引物浓度

C、DNA聚合酶浓度

D、dUTP浓度

E、Mg2+浓度

F、扩增条件，包括变性、复性、延伸的温度和时间等

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多项选择题2.退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素，通常退火温度为

A、Tm

B、Tm减3℃

C、Tm减5℃

D、Tm减10℃

E、Tm加3℃

F、Tm加5℃

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多项选择题3.在一定范围内降低退火温度有以下哪些作用

A、减少引物与靶DNA的错配，提高反应的特异性

B、减少反应的产物量

C、有利于引物和模板的复性

D、容易导致引物与靶DNA的错配，增加非特异性反应

E、提高PCR反应的重复性

F、降低PCR反应的灵敏度

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