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单项选择题改良芽胞染色法有下列五个操作步骤，①用接种环取菌样涂布于玻片上，待自然干燥；②加0.5%沙黄水溶液，染1分钟；③通过火焰加热将菌固定于玻片上；④将涂片放入平皿内，片上放两层滤纸，滴加足量的5.00%孔雀绿水溶液。将平皿盖好，放54～56℃条件下，加热30分钟。取出，去滤纸，用自来水冲洗残留孔雀绿溶液；⑤水洗，待干后镜检。正确的排列顺序是

A、①②③④⑤

B、①④③②⑤

C、①④②③⑤

D、①③④②⑤

E、①③②④⑤

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