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- 简答题三点校正法(UV法)测定维生素A的原理及波长选择原则是什么?
- 主要原理:①供试品中干扰物质(有关物质及稀释用油)的吸收在310~340nm的波长范围内呈线性,即在维生素A最大吸收波长附近,干扰物质的吸收几乎呈一条直线。②物质对光的吸收具有加和性,即在供试品溶液的吸收曲线上,各波长处的吸光度是维生素A的吸收与无关吸收的加和值,吸收曲线也是两者吸收曲线的叠加。
波长选择原则:三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处(即λ
);其他两点选择在λ
的两侧各选一点(λ
和λ
)。①第一法(等波长差法):使λ
-λ
=λ
-λ
。测定维生素A醋酸酯时,λ
=328nm,λ
=316nm,λ
=340nm,△A=12nm。②第二法(等吸收比法、等吸收度法、等吸收差法):使A
=A
=6/7A
,测定维生素A醇时,λ
=325nm,λ
=310nm,λ
=334nm。
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