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简答题试阐述血红蛋白测定的主要方法及其方法学评价。
  • 血红蛋白测定法包括:①氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)为国际标准参考方法。操作简单、显色快且结果稳定可靠,可检测除SHb外的各种血红蛋白。KCN有剧毒,且存在高白细胞和高球蛋白血症可致试剂混浊,以及HbCO转化较慢等问题。②十二烷基硫酸钠(SDS)血红蛋白测定法可替代HiCN法。SDS与Hb作用(除SHb外),生成SDS-Hb棕红色化合物,其吸收峰在538nm,SDS可用HiCN法定的抗凝血或溶血液,制备标准工作曲线。本法操作简单,呈色稳定,准确性和精确性符合要求,且无公害,为次选方法。SDS本身质量差异较大,且破坏白细胞,不适用于同时有白细胞计数和Hb测定的血细胞分析仪上使用。③叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法具有与HiCN测定法相似的优点,显色快而稳定,试剂毒性仅为HiCN的1/7,但仍存在公害问题。④碱羟血红蛋白(AHD575)测定法,试剂简单,不含有毒剂,呈色稳定,可用氯化血红素作标准品。但此法在血液分析仪中的应用受限。⑤多参数血液分析仪测Hb已逐步取代手工法,操作简单、快速,同时可以获得多项红细胞的参数。其测定原理多采用HiCN法,但由于各型号仪器使用的溶血剂不同,形成Hb的衍生物不同。仪器要经过HiCN标准液校正后,才能进行Hb测定。
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