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- 简答题基因诊断中常用的分子生物学技术有哪些?
- (1)核酸分子杂交:Southern印迹法、Northern印迹法、斑点杂交、原位杂交等各种核酸分子杂交技术均可用于基因诊断。 (2)聚合酶链反应(PCR):PCR技术在基因诊断中已得到广泛应用。在应用中,PCR正常与其他分子生物学技术联合应用。 (3)单链构象多态性检测:单链多态性(SSCP)检测是一种基于单链DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,产生了单链构象多态性。长度相同而构象不同的单链DNA在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中表、现出不同的迁移率。SSCP常与PCR联合应用,称为PCR-SSCP技术。 (4)限制酶酶谱分析:基因突变可能导致基因上某一限制酶识别点的丢失或其相对位置发生改变,以此酶消化待测DNA和野生型对照DNA,通过比较二者的酶切片段的长度、数量上的差异就可判断待测DNA的突变情况。 (5)DNA序列测定:DNA序列测定是进行基因突变检测最直接、最准确的方法,不仅可确定突变的部位,而且可确定突变的性质。 (6)DNA芯片技术:DNA芯片技术是近年来兴起的基因分析与检测的新技术,以其快速、敏感、高效、平行化、自动化等特点,将发展成为一代基因诊断技术。它不但可检测基因的结构及其突变、多态性,而且可对基因的表达情况进行分析,因此前景非常广阔。
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