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简答题简述2-DE(双向凝胶电泳)的基本步骤。
  • (1)样品制备,包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等。 (2)固相pH值梯度胶(IPG)胶的制备,利用不同pH固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶。 (3)双向电泳,先作第一向电泳,再进行第二向电泳。 (4)蛋白质的染色,主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择,常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。
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