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简答题试述单克隆抗体技术及杂交瘤细胞的获得方法
  • 利用B细胞产生特异性抗体的能力与骨髓瘤细胞的无限生长能力，将两者融合形成杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内可获得大量的高效价、单一的特异性抗体，该技术即单克隆抗体技术。 杂交瘤细胞的获得方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合，采用HAT选择性培养基［培养基中加次黄嘌呤(H)，氨基蝶呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)］培养筛选。在这种培养基中，由于变异的瘤细胞不具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷激酶，不能利用培养基中的次黄嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA，只能利用谷酰胺与尿核苷酸单磷酸合成DNA，这一途径又被氨基蝶呤所阻断，所以未融合的瘤细胞不可避免地死亡。融合的杂交瘤细胞由于脾淋巴细胞具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，可以通过次黄嘌呤合成DNA，克服氨基蝶呤的阻断，因此杂交瘤细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于2周内均死亡。

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