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简答题乳酸脱氢酶的顺向反应和逆向反应各有什么优点?
  • 以乳酸为底物的反应称作顺向反应,以丙酮酸为底物的反应称作逆向反应。顺向反应的优点是: (1)此法所需的氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)较逆向反应需用的还原性辅酶Ⅰ(NADH)稳定,易得纯品,含抑制LDH的杂质少,价格也较低; (2)乳酸钠(或乳酸锂)底物比丙酮酸底物稳定; (3)过量乳酸对LDH的抑制低于过量丙酮酸对LDH的抑制。 逆向反应的优点: (1)NADH用量少,只是正向反应所用NAD+的3%; (2)酶反应速率也比乳酸盐法快,单位时间内吸光度的变化较大,能使用比较少的样品在较短的时间内进行测定; (3)酶活力随时间的线性关系较长; (4)用NADH或丙酮酸盐启动反应,其反应速度相同,而由乳酸盐到丙酮酸盐的反应中,LDH活力取决于使用的启动剂。
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