试题详情
- 简答题血清总T
测定
- 【方法】
放射免疫分析法(ria)。
【操作】
以中国原子能研究院的药盒说明书为例:
1.试剂内容及配制
(1)
i-t
:红色,148~185kbq(4~5μci)/22ml,含有巴比妥钠缓冲剂、ans、bsa,直接用于实验。 (2)抗t
血清:含有巴比妥钠缓冲剂、bsa、nan
,使用时加入22ml蒸馏水,溶解后为蓝色液体,放置10分钟后用于实验。 (3)t
标准品:配制在去t
正常人血清中,使用时分别加入500μl蒸馏水,放置10分钟并轻轻旋转瓶子使其充分溶解,方可用于实验。 (4)peg:含巴比妥钠缓冲剂,溶液直接用于实验。 2.分析步骤 (1)严格按照操作顺序表加试剂。
(2)各管加入peg后充分混匀,在离心机上以3500r/min的转速离心15分钟。 (3)立即弃去上清液。 (4)测t管及各管沉淀部分的放射性计数率。 【结果计算】 1.以沉淀管计数率减去仪器本底计数率得b
以b为纵坐标,以t
标准浓度为横坐标,在直角坐标纸上作标准曲线。待测样品的沉淀计数率减去本底的计数率后,在标准曲线上查出样品的t
含量。 2.以b/b
×100为纵坐标,以t
标准为横坐标,在三级半对数坐标纸上作标准曲线。待测样品的b/b
×100在标准曲线上查出样品的t
含量。 b/b
×100=标准(样品管计数率-本底计数率)/(零标准管计数率-本底计数率) 以上两种计算方法任用哪一种都可以。目前多以计算机自动计算结果并得出质控指标。 【提问】 简述影响放射免疫分析测定结果的常见原因。 (1)各种仪器设备的准确性、稳定性和效率不好。 (2)药盒的纯度、质量、稳定性不佳。 (3)基本操作如取样、提取、沉淀、分离、保温条件不适当,工作人员不遵守操作规程,加样器使用不当等。 (4)样品收集不好,储存温度不适等。 (5)测量及标准曲线制作不好。
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