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- 简答题影响电泳迁移率的因素有哪些?
- 影响因素有: (1)电场强度:电场强度是指每1Cm的电位降,亦即电势梯度。电场强度愈高,带电质点移动速度愈快。 (2)溶液的pH值:溶液的pH值决定了化合物解离的程度,也决定了质点所带的净电荷。对蛋白质氨基酸等两性电解质,其溶液pH值离等电点愈远,质点所带净电荷愈多,向相反电极的电泳速度也愈快。因此选择适宜的pH值电极液,将有利于各种蛋白质的分离。为了使溶液pH值在电泳过程中保持恒定,必须使用缓冲溶液。 (3)溶液的离子强度:溶液的离子强度越高,质点的泳动速度愈慢,但区带分离度却较清晰;反之则越快,区带分离度亦较差。所以电极溶液的离子强度必须选择最佳数值。 (4)电渗:在电场作用下对于固体支持物的相对移动称为电渗。由于固体支持物多孔,常吸附溶液中的正离子或负离子,使溶液相对带负电或正电。在电场中,溶液就向正极或负极移动。为此,在选择支持物时应尽量避免选用具有高电渗作用的物质。 (5)其他:如缓冲溶液的粘度、缓冲溶液与带电质点的相互作用以及电泳时的温度变化、电压不稳等因素也都能影响电泳速度。
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