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简答题双向电泳时IPG胶条如何平衡，并综述平衡液中各组分作用？
  • 第一向和第二向电泳缓冲液完全不同，因此IEF结束后，应对IPG胶条进行平衡，其目 的是使IPG介质与第二向电泳缓冲体系一致，并保证蛋白质的变性和还原状态，以保证在 第二向SDS-PAGE中蛋白质能够有效分离。 吸去IPG胶条上残留的液体后，将IPG胶条在pH为8.8的Tris缓冲液中进行平衡，平 衡液中还包括了 DTT、SDS、尿素和甘油等，其中尿素和甘油的作用是削减电渗效应的影 响，DTT和SDS可以保证蛋白质处于还原状态，并与SDS完整结合。此后再进行第二次平 衡-使用碘乙酰胺代替DTT，主要是通过烷

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