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- 简答题酶动力学法和ELISA测定抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的原理分别是什么?其结果有何区别?
- 原理:①酶动力学法以L-酒石酸钠作为抑制剂,以4-硝基苯磷酸盐为底物测定酶活性。 ②ELISA:用纯化的TRAP抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品和质控品,TRAP与孔内包被的抗TRAP单克隆抗体结合。加入底物4-APP温育,颜色的深浅和样品中的TRAP呈正相关。用酶标仪在405nm波长下测定吸光度(0D值),计算样品 浓度。 区别:酶动力学法测定的是骨性TRAP的酶活力,而ELISA测定的是骨性TRAP的含量,由于纯化的TRAP抗体不能完全识别骨性TRAP,因此不能完全代表骨代谢的异常。
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