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- 简答题简述细胞核移植技术的主要类型及其主要操作技术。
- 细胞核移植(nuclear transfer 或nuclear transplantation)是指通过显微操作的方法,将供体细胞的细胞核放入预先去核的成熟卵母细胞或早期合子内,形成一个新的核质重组体,移入的核在受体胞质的作用下,发生发育程序重编 (reprogramming),使得核质重组体与正常受精卵一样,经细胞分裂、分化并在母体内发育成一个新的个体。 依据供体细胞类型分为:胚胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植、体细胞核移植;依据供体细胞与受体卵母细胞的来源分为:同种核移植、种间核移植 。 主要操作技术:1. 受体卵母细胞的准备:超数排卵、活体采卵、屠宰后母畜卵巢上采卵(体外成熟)2. 供体细胞的准备:16-32 期胚胎、供体卵裂球。3. 卵母细胞的去核与注射4. 重组胚的融合:构建的重组体用直流电脉冲进行电融合5. 重组胚的激活:电激活、乙醇激活、钙离子和钙离子载体激活、离子霉素(ionomycin)激活、Sr2+ 激活6. 重组胚的培养与胚胎移植。
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