试题详情
- 简答题试述PCR的主要操作步骤。
- ①变性,将反应体系加热至95℃,使模板DNA完全变性成为单链,同时引物自身以及引物之间存在的局部双链也得以消除;②退火,将温度下降至适宜温度(一般较Tm低5℃)使引物与模板DNA退火结合;③延伸,将温度升至72℃,DNA聚合酶以dNTP为底物催化DNA的合成反应。上述三个步骤称为一个循环,新合成的DNA分子继续作为下一轮合成的模板,经多次循环(25~30次)后即可达到扩增DNA片段的目的。
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