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简答题试述PCR技术的基本原理及主要操作步骤。
  • 原理：以拟扩增的DNA为模板，以一对分别与模板5'-端和3'-端互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。主要步骤：①变性，将反应体系加热至95℃,使模板DNA完全变性成为单链，同时引物自身以及引物之间存在的局部双链也得以消除；②退火，将温度下降至适宜温度（一般较Tm低5℃）使引物与模板DNA退火结合；③延伸，将温度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP为底物催化DNA的合成反应。上述

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